作者：马瑞

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流行病调查数据显示，我国白血病发病率为十万分之三到十万分之四，呈上升和低龄趋势。其中AML是成人急性白血病中发病率最高的一种类型，约占60%，在儿童急性白血病中约占15%~20%。

迄今为止，异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）是目前有望治愈高危或化疗失败AML患者的唯一治疗手段，但移植前处于难治/未缓解状态或高水平微小残留病（MRD）的患者移植后复发率仍可达50％～80％。患者一旦复发，治疗效果和预后极差，中位生存期小于6个月。针对临床allo-HSCT后复发的AML患者，目前国内外治疗手段极其有限，是困扰临床治疗的一大难题。

早在2000年，多伦多大学张丽教授团队在 Nature Medicine 发表论文，发现了一种特殊的 T 细胞亚群——双阴性 T 细胞（double-negative T cells，DNT），它们不表达 CD4 和 CD8，并因此得名。

后续研究中，张丽团队发现，从AML患者或健康人的外周血中均能分离并培养扩增DNT细胞，且该细胞具有抗AML效应，更关键的是，DNT细胞不会引起移植物抗宿主病（GvHD）。张丽教授因此提出了可将DNT细胞开发为一种新型的细胞疗法，而且有望开发成现货型CAR-T疗法，解决当前CAR-T疗法工艺复杂、费时且异常昂贵的难题。

2022年4月22日，张丽教授团队在《Science》子刊《Science Immunology》发表了题为：《Allogeneic double-negative CAR-T cells inhibit tumor growth without off-tumor toxicities》的研究论文。

该研究在B细胞急性淋巴细胞白血病（B-ALL）和非小细胞肺癌（NSCLC）小鼠模型中证实，CD19靶点的双阴性CAR-T细胞（CD19-CAR-DNT）能够有效根除血液瘤和实体瘤，且不会引发移植物抗宿主病（GvHD）。这表明了同种异体CAR-DNT疗法为一种有效的癌症治疗方法。

张丽教授研究论文

来源：参考资料2

此外，曾在加拿大多伦多大学医学院攻读博士后的瑞顺生物创始人兼董事长杨黎明亦专注于DNT细胞细胞领域，并开发出国内首个进入注册临床试验的非基因编辑异体T细胞药物RC1012细胞注射液。

近期，现货通用型DNT细胞药物开发全球领跑者瑞顺生物宣布完成5900万元人民币A+轮融资。所融资金将用于公司现货通用型DNT细胞系列药物研发，加速推进RC1012注射液治疗复发难治急性髓系白血病（r/rAML） 的验证性Ⅱ期临床试验及其临床新适应症研究，CD19-CAR-DNT细胞产品IND申报，以及新产品管线的临床前研究等。

瑞顺生物创始人杨博士介绍，DNT细胞技术平台产品的优势主要体现在四个方面：

一是DNT细胞从健康捐赠者中提取，制备成本低，可建立标准化生产工艺，可提前制备，避免了使用自体来源细胞进行细胞治疗存在的取材、规模化工艺生产、可及性等限制。同时，异体DNT细胞产品不被患者的免疫细胞所识别排斥，不会引起宿主抗移植物反应。

二是DNT细胞与其它小分子药物和免疫检验点抑制剂抗体，如PD-1抗体联用，可以起到“1+1＞2”的协同效果。单用PD-1治疗非小细胞肺癌的有效率仅20％左右，且需持续用药，而DNT细胞联合PD-1抗体治疗的有效率可达50％以上，可有效提高非小细胞肺癌疗效并降低治疗费用。

三是基于DNT细胞先天不引起GvHD的通用型特性，无需对其进行相关基因敲除，可直接引入CAR基因片段而实现通用型CAR-DNT系列产品的开发，极大地提高了开发效率并降低成本。瑞顺生物的首个CAR-DNT细胞管线已证明对CD19+急性淋巴细胞白血病和非霍奇金淋巴瘤具有强大、快速和持续的体外杀瘤作用，目前正在计划验证其在动物体内的安全性和药效、药代动力学特征。

四是DNT细胞可以进行基因编辑，进一步加强DNT细胞杀瘤活性，增强DNT细胞对实体瘤的浸润以清除肿瘤细胞。

基于DNT细胞的上述众多优势，瑞顺生物布局了8个研发管线，探索DNT细胞在血液肿瘤（复发难治急性髓系白血病、非霍奇金淋巴瘤）和实体肿瘤（非小细胞肺癌、肝癌、胃癌、结直肠癌、宫颈癌和卵巢癌）等肿瘤中的治疗潜力。

其首个核心产品RC1012细胞注射液是一种同种异体DNT细胞，已于2020年在中国获批开展治疗复发难治急性髓系白血病（AML）的临床试验。瑞顺生物曾指出，这是中国境内首个进入注册临床试验的非基因编辑异体T细胞产品。目前，该临床试验正在浙江大学附属第一医院血液科开展。

RC1012主要成分为DNT细胞，属于天然免疫细胞，来自健康捐赠者外周血单个核细胞，富含CD3+CD4-CD8-T细胞亚群，对AML患者肿瘤原始细胞具有显著的特异性杀伤作用。前期临床研究已证明，该产品在输注患者后不引起移植物抗宿主病和其他严重不良反应，具有良好的安全性和显著疗效。

与新鲜制剂相比，冻存制剂可提前制备并完成所有质检项目后预先储存在液氮罐中长期保存，患者在临床上可得到及时治疗，避免了目前新鲜制剂需要的细胞制备等待周期，有望使一些病情快速进展的病人得到及时治疗。

当对病人施用DNT细胞时，就可以将其直接拿到医院或护士站，即刻复融复苏，待细胞醒来，室温下即可给病人使用。这是一项革命性技术。

很多药企闻风而动，朝着DNT细胞领域努力。但即将面临的问题是定价。

随着成本的提高，产品价格水涨船高。不断走高的制备及生产成本如何从商业渠道获得回报，是各家企业均要考虑的问题。事实上，为了更好立足市场，各家企业都在谋求成本降低及技术改进。

瑞顺生物的改进策略，或值得借鉴：

一、细胞扩增。目前瑞顺生物已经能够做到在2~3周时间内，一毫升的外周血可以获取将近10亿细胞，处于行业领先地位。

二、细胞杂质细致研究。细致研究细胞杂质，最终目的要符合安全性、有效性、质量可控性三个成药性特点。

三、在冻存制剂工艺上做出突破。

四、未来朝全封闭自动化角度发展。让整个产品生产流程形成闭环，实现可控、安全性更高。

五、注意专利问题，保护知识产权。

六、保持现金流。现金是企业发展的血液，现金是企业的支撑之一。

七、如果想做国际化，就要组建新团队，海内海外要兼顾。

八、在国内，要考虑中国本土化特点，不能只是拿来主义，要不断论证、完善，接地气。

各行各业都需要创新，医药也是。没有创新，就会故步自封，裹足不前。但在创新的同时，还要具备高度的责任感，切合实际。在保证效果及安全性之外，还要注重针对大众的可及性。

老百姓用得起，DNT细胞药物的存在才更具意义，市场也会更大。

参考资料：

1.《 瑞顺生物：国内首个治疗复发难治急性髓系白血病的异体DNT细胞药获批临床》，金融界，2021-01-18；

2. 《多伦多大学张丽教授：20余年持续探索，双阴性T细胞疗法走向临床 》，搜狐，2022-04-29；

3.《开发“现货通用型”T细胞疗法，瑞顺生物完成5900万元A+轮融资》, 药明康德,2022-08-18。